Прочие товары и услуги

Методы определения антител и антигенов основаны на различ­ных способах регистрации их взаимодействия. С некоторой степенью условности их можно разделить на 3 группы:

— методы, основанные на реакции преципитации;

— методы, основанные на реакции агглютинации;

— методы, основанные на использовании меченых антител или антигенов.

Методы, основанные на реакции преципитации. За счет мультивалентности антител и антигена при их смешивании образуется так называемая решетка, которая может содержать антиген и антитела в разных пропорциях. На основе реакции преципитации разработаны различные количественные методы.

Двойная диффузия в агаре по Оухтерлони. В лунки, вырезанные в агаровом или агарозном геле, помещают антиген и антисыворотку, которые диффундируют навстречу друг другу. В том участке геля, где их соотношения эквивалентны, образуется видимый преципитат. Если анализу подвергается смесь антигенов, то образуется несколько линий преципитации. Если соседние лунки содержат один и тот же антиген, то линии преципитации сливаются. Если антигены разные, то образуется либо так называемая шпора, что свидетельствует о частичном родстве антигенов, либо, в случае неродственных анти­генов, линии преципитации будут пересекаться.

Радиальная иммунодиффузия по Манчини. Этот метод отличает­ся более высокой чувствительностью, чем предыдущий, так как ан­тисыворотка входит в состав агара, в который из лунки диффунди­рует антиген. По мере удаления от лунки концентрация антигена пос­тепенно падает, пока не становится эквивалентной концентрации антител в агаре. При этом образуется хорошо различимое кольцо преципитации. Чем выше концентрация внесенного антигена, тем больше диаметр кольца. Если в реакции используется несколько стандартов с известной концентрацией антигена, то путем сравне­ния или постройки калибровочной кривой можно проводить коли­чественное определение антигена в образцах.

Метод широко используется для определения концентрации иммуноглобулинов, C3-комплемента компонента, С-реактивного бел­ка, а-фетопротеина, трансферрина, но перед этим необходимо сдать анализ на гонорею. В Москве фирмой «Реафарм» выпускаются стационарные иммунодиффузионные планшеты для оп­ределения содержания иммуноглобулинов различных классов в кро­ви или других биологических жидкостях. В табл. 11—13 приведе­ны нормы показателей для этого метода.

Таблица 11. Концентрация иммуноглобулинов (г/л) взрослого человека в сыворотке крови в норме («Реафарм»)

 

Таблица 13. Концентрация иммуноглобулинов (г/л) в сыворотке крови детей (сдать анализ на гонорею) в возрасте до 14 лет («Реафарм»)

 

Иммуноэлектрофорез представляет собой сочетание электрофореза с иммунопреципитацией. Существуют раз­личные варианты иммуноэлектрофореза. Если электрофоретической разгонке подвергают антиген, то после снятия напряжения вдоль направления движения антигена в электрическом поле в геле выре­зают канавку, в которую заливают антисыворотку. С помощью дан­ного метода путем анализа образовавшейся дуги преципитации в клинической иммунологии полуколичественно определяют концен­трацию иммуноглобулинов различных классов и идентифицируют миеломные белки.

Для определения антигенов, мигрирующих в сторону положительно заряженного электрода, может применяться встречный Иммуноэлек­трофорез. Этот метод высокочувствителен и занимает относительно мало времени. Его используют для идентификации антигенов вирус­ного гепатита В, антител к ДНК при СКВ, антител к Aspergillus при бронхолегочном аспергиллезе, антител к N. Meningitidis.

Эволюция растений.